DNA 恆溫快速擴增試劑盒（膠體金試紙條型）

【原理概述】 

本試劑盒基於一種常溫恆溫核酸快速擴增技術：在常溫恆溫下（一般為 39 ºC~42 ºC）， 在輔助蛋白和單鏈結合蛋白的幫助下，重組酶和引物形成複合體；進行同源搜索並結合目的同源域，此時在該同源位置形成D-loop 區並開始進行鏈交換；伴隨着重組酶從複合體上解離，聚合酶也結合到引物的 3』末端，開始鏈的延伸。依賴nfo 酶的作用，加入根據模板設計的特異的分子探針，使用膠體金技術（三明治夾心法）可以對最終結果進行檢測。

【產品特點】 

本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應時 間短（僅需 15 min）等優點，反應組分為乾粉狀態，操作簡便，易於保存。 本試劑對設備要求低，金屬浴、水浴鍋等即 可進行反應操作，無需購買 PCR 擴增儀等 價格高昂的專屬設備。

【引物設計】 

建議使用長度在30-35 bp 的引物，引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度；下游引物的 5』端標記一個修飾基團（常用生物素）。引物設計避免形成二級結構而影響擴增；擴 增子長度建議在150-500 bp。

【膠體金探針設計】

在上下游引物中間，設計一段長度為46-52nt 與目的片段互補的序列；5』端修飾一個抗原 標記（典型 FAM）；在 5』端和 3』末端的中部 位置標記一個 dSpacer（四氫呋喃，THF）， 作為 nfo 的識別位點；3』末端標記一個修飾 基團，例如胺基、磷酸基團或 C3-Spacer 等。

【試劑盒儲存】 

1．儲存條件：儲存溫度 ≤ -20 °C 恆溫環境， 避光保存，避免重壓； 

2．產品有效期：14 個月； 

3．生產日期見外包裝。

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【注意事項】

1. 使用前請仔細閱讀說明書，嚴格按照操 作步驟進行操作；

2. 樣品處理應該嚴格按照生物安全規範操 作，在進行反應時請注意避免核酸污染，並設置空白對照；

3. 使用時請取出實驗所需的MIRA 反應單元的數量，剩餘分請置於存儲條件下； 

4. 使用有效期內試劑，且各組分不得與其他批號的相應成分混用。