|
可實現的核酸膠體金試紙條法如何將傳統分子檢測方法變的更加簡單易懂、操作方便和快速精準。不断是分子檢測行業的一大課題。各個廠家和科研院所都在這方面投入了大量的時間和金錢。。 bbin宝盈(中国)有幸在該領域完成了突破和革新。在熒光檢測領域,自主研發的MIRA技術將60分鐘以上的核酸擴增階段,縮短到20分鐘。其開發了「核酸膠體金試紙條法」,可徹底拋棄掉高昂的檢測設備,僅需配備簡單的溫控儀器即可(如金屬浴、水浴鍋等),甚至42°溫水和利用人體溫度亦可完成擴增反應,且核酸擴增時間進一步縮短到10分鐘不到。其結果的準確率與傳統PCR檢測方式準確率一致。 具體操作方法如下: 1. 採用我司自主開發的快速核酸擴增試劑提取核酸(核酸釋放劑與樣本混勻,室溫靜置5分鐘即可取上清作為核酸模板),或者採用市場常見「離心柱法」和「磁珠法」提取核酸作為模板亦可; 2. 取上述模板2μL加入到復融後的反應液中,顺利获得上述各種加熱手段,保證加熱溫度在37°~42°之間10分鐘即可。 3. 上述反應時間結束後,向反應液中加入少許無菌水稀釋,後直接插入試紙條,則馬上可顺利获得試紙條上的條帶顏色變化,從而判定陰陽性。 2 自主研發用時,引物設計注意事項: 核酸試紙條三明治夾心檢驗法探針設計:在上下游引物中間設計一條長度為46-52nt與目的片段互補序列;5』端修飾一個抗原標記(典型FAM);5』端和3』端中間位置標記一個dSpacer(THF);3』端標記一個修飾基團,如胺基、生物素或C3-Spacer,同時要求下游引物5』端標記一個修飾基團。 該方法極其適用於現場核酸提取。可應用於傳染病初篩、食品安全、寵物疾病檢測、活體市場抽檢等各種不具備完整分子檢測條件下的核酸測試。對操作人員專業水平要求低,檢測結果可信度高。 MIRA反應原理 試紙條汲取反應液 觀察檢測結果 |